LB 培养基的配方如下: 胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl) 10g/L 另外根据经验值用 NaOH 调节该培养基的 pH,使其达到 7.4(该 pH 适合目前使用最广的原核表达菌种 E.coli 的生长) 固态培养基LB 固体培养基 1L 和液体一样,加 10g~15g 琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗生素,并且倒好板。 SOB 培养基(Super Optimal Broth) 配制每升培养基,在 950ml 去离子水中加入: 胰化蛋白胨 20g 酵母提取物 5g NaCl 0.6 g 摇动容器使溶质完全溶解。
加 10ml 250mmol/L KCl 溶液(将 1.86g KCl 用 100ml
去离子水溶解即配成 250mmol/l KCl 溶液)。
用 5mol/L KOH 调 pH 值至 7.0。
用去离子水定容至 1L。
在 121℃高压蒸汽灭菌 20min。
该溶液在使用前,加入 5ml 灭菌的 2 mol/l MgCl2[2mol/L MgCl2 溶液的配制方法如下:用 90ml 去离子水溶解 19g MgCl2,用去离子水调整体积为 100ml,在 121℃高压下蒸汽灭菌 20min]。
用途:比 LB 的营养更加丰富,可增加转染效率。
SOC 培养基
组份浓度:
2% (W/V) Tryptone(胰化蛋白胨 ) ,
0.5% (W/V) Yeast Extract ,0.05% (W/V) NaCl ,
2.5 mM KCl 10 mM MgCl2,
20 mM glucose。 配制量:100 ml 配制方法 1. 配制 1 M 的 glucose 溶液: 将 18 g 的 glucose 溶解在 90 ml 的去离子水中, 定容至 100 ml,用 0.22 μm 滤膜过滤除菌。 2. 向 100 ml SOB 培养基中加入除菌的 1 M glucose 溶液 2 ml,均匀混合。 3. 调节 ph 值等于 7。 4. 4℃保存。 作用:含营养较之 LB 培养基更为丰富,可用于电转化后的感受态细胞的复苏。 优点:配好后分装,放在-20℃的低温冰箱中保存,因是分装,可以避免因取液而发生 的污染,可以保存很长时间。
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