ＩＳＳＮＩＯ０７—８７３８细胞与分了免疫学杂志（Ｃｈｉｎ Ｊ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏ１）２０１０．２６（７ ７０３ ・论著・ 文章编号：１００７—８７３８（２０１０）０７—０７０３—０２ ＭＭＰ－２在子宫内膜异位症中的表达及临床意义 孙成玲（第４２１医院妇产科，广东广州５１０３１８） ［摘要］ 目的：研究基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ一２）在子宫内膜 异位症（ＥＭｓ）中的表达。方法：检测ＥＭｓ患者异位内膜３６ 皮，上皮下为内膜的问质细胞。按美国生育协会（ＡＦＳ）修正 标准分期评分（ＲＡＳ评分） Ｊ：Ｉ期和Ⅱ期１６例，其中增生期 ８例，分泌期８例；１１Ｉ期和ＩＶ期２０例，其中增生期８例，分 泌期１２例。（２）在位内膜组：选择上述子宫内膜异位症患者 例、在位内膜３６例及正常内膜中的ＭＭＰ一２的表达情况，以 平均光度作为ＭＭＰ一２的表达强度。结果：（１）异位内膜组、 在位内膜组、正常内膜组ＭＭＰ一２平均吸光值分别为０．１８４７ ４－ ０．０１０９、０．１５２９±０．０１１２、０．１５０９±０．０ｌ１２。异位内膜组的 ＭＭＰ一２平均吸光值显著高于其余两组（Ｐ＜０．０５）；在异位内 膜组中，ＭＭＰ－２蛋白在增生期平均吸光值显著高于分泌期 （Ｐ＜０．０５），在正常内膜组和在位内膜组中，ＭＭＰ一２蛋白在 增生期平均吸光值高于分泌期，但差异无统计学意义。结论： 异位内膜、特别是异位内膜增生期存在ＭＭＰ－２的高表达，可 能导致了细胞外基质的降解、血管生成，利于种植及生长， 更易发生远处部位的种植转移；检测ＭＭＰ－２的表达可用于判 断子宫内膜异位症的侵袭转移和评估预后。 ［关键词］子宫内膜异位症；基质金属蛋白酶２；发病机制 ［中图分类号］Ｒ３９２．１１ ［文献标识码］Ｂ 子宫内膜异位症（ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｓｉｓ，ＥＭｓ）是指有功 能的子宫内膜腺体和间质出现在子宫腔被覆黏膜以 外，且影响正常的生理功能。是生育年龄妇女常见 的慢性病，发病率有逐年上升的趋势，达１０％～ １５％，占妇科手术的约３０％¨ 。有研究表明基质金 属蛋白酶家族与内异症发生发展有关。基质金属蛋 白酶２（ｍａｔｉｒｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ一２，ＭＭＰ－２）是基质金 属蛋白酶家族的重要成员，一些研究显示ＥＭｓ和腺 肌病患者的异位和在位内膜ＭＭＰ一２表达明显高于非 患者的子宫内膜，提示ＭＭＰ ２高表达可能与内异症 和腺肌病的发生密切相关 。本研究通过检测 ＭＭＰ－２在ＥＭｓ异位内膜、在位内膜以及正常子宫内 膜的表达，为ＥＭｓ的治疗提供依据。 １对象和方法 １．１研究对象 （１）异位内膜组：选择２００２—０１／２００７一ｌ０ 我院妇产科收治的子宫内膜异位症患者３６例，取其异位内膜 作为异位内膜组。所有病例均经术后病理证实为子宫内膜异 位症，排外内在性子宫内膜异位症（即子宫腺肌病），无其他 内外科合并症，近３个月未接受过性激素治疗，未经过内异 症药物治疗。术后即取卵巢巧克力囊肿组织，制成石蜡块。 所有标本中应具有较完整的腺体组织或囊壁内层为柱状上 收稿日期：２０１０—０４—０６；接受日期：２０１０—０５—０５ 作者简介：孙成玲（１９７２一），女，山东临沂人，主治医师，本科 Ｔｅｌ：０２０￣１６３６３７６：Ｅ—ｍａｉｌ：ｍａｉｄｏｕ１２２６＠ｙａｈｏｏ．ｃｎ ３６例，取其在位内膜作为在位内膜组。经病理检查无其他子 宫内膜病变。Ｉ期和Ⅱ期１６例，其中增生期８例，分泌期８ 例；１１１期和ＩＶ期２０例，其中增生期８例，分泌期１２例。（３） 正常内膜组：选择同期在我院妇产科因子宫肌瘤而行全子宫切 除患者的子宫内膜２０例。该组患者子宫肌瘤均为浆膜下或肌 壁间肌瘤，子宫小于孕３个月大小，术前未使用过激素治疗， 排除其他子宫内膜病变，其中增生期１０例，分泌期１０例。 １．２主要试剂和仪器ＭＭＰ一２广普试剂盒（福州迈新生物试 剂公司），免疫组化试剂盒、二氨基联苯胺（ＤＡＢ）显色液（北 京中杉生物技术有限公司）；Ｏｌｙｍｐｕｓ ＢＸ５显微摄像系统（日 本ＯＬＹＭＰＵＳ公司），Ｐｏｌａｒｏｉｄ ＤＭＣ数码相机（德国宝丽来公 司），ＨＰＩＡＳ２０００型彩色病理图像分析系统（同济千屏影像工 程公司），ＥＲＭ一３１００半自动石蜡切片机（常州市郝思琳医用 仪器有限公司）等。 １．３方法 １．３．１ ＭＭＰ一２免疫组化检测 标本采集由腹腔镜或开腹手 术中取得子宫内膜异位症患者的在位内膜和异位内膜（卵巢 巧克力囊肿组织），大小约２ ｃｍ×２ ｃｍ×２ ｃｍ，按常规ＨＥ染 色，采用ＤＡＢ显色后，脱水、透明、封片，光镜下复片确诊。 采用链霉素抗生物素蛋白一过氧化物酶（Ｓ－Ｐ）法检测ＭＭＰ一２在 子宫内膜组织的表达水平，其步骤严格按说明书进行。 １．３．２ ＭＭＰ－２阳性结果判断 将免疫组化染色片置于彩色 图像分析系统下进行图像分析，每张切片保持光线强度不变， 随机选择３个视野，测量ＭＭＰ－２阳性细胞平均光密度值，以 平均光度作为ＭＭＰ一２的表达强度。 １．３．３统计学分析所有计量资料采用 ±ｓ表示，统计处 理先用Ｆ检验，再行ｑ检验。配对资料采用配对ｔ检验。数 据分析采用ＳＰＳＳ１３．０统计分析软件，Ｐ＜０．０５为差异有统计 学意义。 ２结果 ２．１三组ＭＭＰ－２平均吸光值比较ＭＭＰ一２主要分布于腺上 皮细胞及基质细胞的细胞质中，腺上皮细胞为主，棕黄色颗粒 为阳性表达。异位内膜组、在位内膜组、正常内膜组ＭＭＰ－２平 均吸光值分别为０．１８４７±０．０１０９、０．１５２９±０．０１１２、０．１５Ｏ９± ０．０１１２。可以看出，异位内膜组的ＭＭＰ一２平均吸光值明显高 于其他二组，相比较有统计学差异（Ｐ＜０．０５），而在位内膜组、 正常内膜组ＭＭＰ．２平均吸光值比较差异无统计学意义。 ２．２ 三组在增生期和分泌期ＭＭＰ－２平均吸光值比较 在异 ７０４ ＩＳＳＮ１００７—８７３８细胞与分子免疫学杂志（Ｃｈｉｎ Ｊ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ￣ Ｑ， 【Ｚ 位内膜组中，ＭＭＰ－２蛋白在增生期平均吸光值显著高于分泌 期，相比较有统计学差异（Ｐ＜０．０５）；在正常内膜组和在位内 膜组中，ＭＭＰ－２蛋白在增生期平均吸光值高于分泌期，但差 异无统计学意义（表１）。 表１ 三组在增生期和分泌期ＭＭＰ一２平均吸光值比较 在ＭＭＰ－２的高表达，这可能导致了细胞外基质的降 解、血管生成，利于种植及生长，更易发生远处部位 的种植转移；检测ＭＭＰ－２的表达可用于判断子宫内 膜异位症的侵袭转移和评估预后。本研究进一步明 确ＭＭＰ ２在子宫内膜异位症发生中的作用，这对探 索子宫内膜异位症的临床诊断和治疗的新方法有着 ３讨论 ＭＭＰ－２是目前研究较多且较重要的ＭＭＰｓ。 ＭＭＰ－２的相对分子质量为７２ ０００，是一种非糖化的 明胶酶，ＭＭＰ－２以前酶原的形式由多种细胞如成纤 维细胞、巨噬细胞、内皮细胞和恶性肿瘤细胞等分 泌 Ｊ。有研究显示ＭＭＰ－２在内异症患者异位内膜的 间质和上皮细胞中均呈高表达 。 在本实验中，与肿瘤细胞的侵袭和转移机制息 息相关的ＭＭＰ－２，在内异症组平均吸光值显著高于 在位内膜组和正常内膜组；进一步通过增生期和分 泌期ＭＭＰ－２吸光值比较，异位内膜组ＭＭＰ一２蛋白在 增生期平均吸光值显著高于分泌期（Ｐ＜０．０５），而正 常内膜组和在位内膜组中ＭＭＰ－２蛋白在增生期平均 吸光值虽然高于分泌期，但差异无统计学意义（Ｐ＞ ０．０５）。说明异位内膜、特别是在增生期细胞具有更 强的产生ＭＭＰ－２的能力，这使得异位内膜具有更强 的水解能力，能降解异位内膜周围的基底膜，破坏腹 膜间质细胞的连接，使异位内膜在腹腔内种植、生长 并使病灶不断扩大 Ｊ。 综上所述，异位内膜、特别是异位内膜增生期存 重要意义。 参考文献： ［１］Ｓｈａｃｏ ＬＲ，Ｓｈａｒａｂｉ Ｓ，Ｂｅｎｈａｒｒｏｃｈ Ｄ，ｅｔ ａ１．Ｍａｔｉｒｘ ｍｅｔａｌｌｏｐ—ｍｔｅｉｎａｓ— ｅｓ２ａｎｄ９，Ｅ・ｃａｄｅｒｉｎ ａｎｄ Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｓｉｓ，ｌｏｗ— ｇｒａｄｅ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ａｎｄ ｎｏｎ－ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ ｅｎｔｏｐｉｃ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｕｍ ［Ｊ］．Ｅｕｒ Ｊ Ｏｂｓｔｅｔ Ｇｙｎｅｃｏｌ Ｒｅｐｒｏｄ Ｂｉｏ，２００８，１３９（２）：２２６—２３２． ［２］Ｋａｎｇ Ｓ，Ｚｕｏ ＬＦ，Ｄｕ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌ叩ｒＵｔｅｉｎａｓｅｓ＿７，－９ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｉｓｋ ｏｆ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｓｉｓ ａｎｄ ａｄｅｎｏｍｙｏｓｉｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｈｕｍ Ｒｅｐｒｏｄ，２００６，１２（１）：３５— ３９． ［３］Ｈｕｄｅｌｉｓｔ Ｇ，Ｌａｓｓ Ｈ，Ｅｃｋｓｔｅｉｎ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１ ａｌｐｈａ ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅ— ｌｙｔｉｃｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ・１ ａｒｅ ｅｌｅｖａｔｅｄ ｉｎ ｅｅｔｏｐｉｃ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｕｍ ｏｆ－ ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｈｕｍ Ｒｅｐｒｏｄ，２００５，２０（６）：１６９５— １７０１． ［４］Ｓａｍｅｓｈｉｍａ Ｔ，Ｎａｂｅｓｈｉｍａ ｋ，Ｔｏｏｌｅ ＢＰ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｅｍｍｐｒｉｎ （ＣＤ１４７），ａ ｃｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ ｉｎｄｕｃｅｒ ｆｏ ｍａｔｉｒｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｍｔｅｉｎａｓｅｓ，ｉｎ ｎｏｒ－ ｍａｌ ｈｕｍａｂｒａｉｎ ａｎｄ ｇｌｉｏｍａｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ，２０００，８８（１）：２１— ２７． ［５］Ｙｏｓｈｉｄａ Ｍ，Ｓａｇａｗａ Ｎ，ｈｏｈ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｆ（２Ｍｐｈａ），ｃｙｔｏ－ ｋｉｎｅ ａｎｄ ｃｙｃｌｉｃ ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ ｓｔｒｅｔｈ ａｕｇｍｅｎｔ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ—ｓｅ． ｃｒｅｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｈｕｍａｎ ｕｔｅｒｉｎｅ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｆｉｂｍｂｌ￣ｔ ｃｅｌｌ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｌｕｍ Ｒｅｐｒｏｄ，２００２，８（７）：６８１—６８７． ［６］Ｃａｕｄｏｒｙ Ｓ，Ｐｏｌｅｔｔｅ Ｍ，Ｔｏｕｍｉｅｒ ＪＭ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｏ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｅｌ・ ｌｕｌａｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｉｎｄｕｃｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ｍａｔｉｒｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－２ ｉｎ ｂｒｏｎｃｈｏｐｕｌｍｏｎａｒｙ ａｎｄ ｂｒｅａｓｔ ｌｅｓｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｊ Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ Ｃｙｔｏｃｈｅｍ， ２００８，４７（１２）：１５７５—１５８０．
