AMAMFSJp0024维生素C 高效液相色谱法 定量
AM-AM-FS-Jp-0024
维生素C的高效液相色谱法定量测定（含异抗坏血酸添加剂的试料）
1.适用范围
本方法适用于含异抗坏血酸添加剂的样品
2.原理概要
3.主要试剂和仪器
3.1.主要试剂
10%（w/v）的偏磷酸溶液：同4.2.1.1中1）。
0.5%（w/v）的偏磷酸溶液：用时将10%（w/v）的偏磷酸溶液稀释而得。
坏血酸及异抗坏血酸标准溶液：准确称取L-抗坏血酸及异抗坏血酸标准品100mg，溶于0.5%（w/v）的偏磷酸溶液，并定容于100mL。该标准原液进一步用0.5%（w/v）的偏磷酸溶液稀释即得所需浓度的标准溶液。使用时调制。
腈：高效液相色谱用。
3.2.仪器
高效液相色谱仪：带有紫外-可见检测器的高效液相色谱仪。
4.过程简述
4.1.高效液相色谱条件
色谱柱：LiChrosorb-NH2（4mm i.d ×250mm）。
移动相：乙腈∶水∶醋酸(87∶11∶2)
流 速：3mL/min
检出器：紫外-可见检测器（254nm）
4.2.定量
分别将试验溶液和各标准溶液各（5～20）μL分别进行上述高效液相色谱条件下的分析，以L-抗坏血酸或异抗坏血酸的浓度对峰高作共做标准工作曲线，由该标准工作曲线求出试验溶液中L-抗坏血酸或异抗坏血酸量。
另外，也可使用内标物邻苯二甲酸一缩苯胺。
若是L-抗坏血酸钠或异抗坏血酸钠的情况下，乘以系数1.125换算成L-抗坏血酸异抗坏血酸的量。
5.结果计算
试料100g中L-抗坏血酸的含量(mg)，异抗坏血酸的含量(mg)用下式算出。
试料中L-抗坏血酸的含量（mg/100g）
=S×(a×b/试料取样量(g)) ×(100/1000)
试料中异抗坏血酸的含量（mg/100g）
=s×(a×b/试料取样量(g)) ×(100/1000)
S—试验溶液中含L-抗坏血酸量（μg/mL）
S—试验溶液中含异抗坏血酸量（μg/mL）
a试验溶液总量（mL）
b—试验溶液的稀释倍数
6.来源：
《卫生试验法·注解》2000版 日本药学会编